PAPEL DE LA PROTEÍNA LRP EN LA REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE LOS GENES INVOLUCRADOS EN LA SÍNTESIS DE LA TOXINA TILIVALINA DE KLEBSIELLA OXYTOCA

ROBLES LEYVA, MAYRA NAYELY (2022) PAPEL DE LA PROTEÍNA LRP EN LA REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE LOS GENES INVOLUCRADOS EN LA SÍNTESIS DE LA TOXINA TILIVALINA DE KLEBSIELLA OXYTOCA. Maestría thesis, UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIHUAHUA.

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Resumen

Klebsiella oxytoca forma parte de la microbiota intestinal; sin embargo, en algunos pacientes tratados con antibióticos, prolifera y produce colitis hemorrágica asociada a antibióticos (CHAA) (Hering et al., 2019). La CHAA es causada por la toxina tilivalina, la cual es un metabolito sintetizado por enzimas codificadas en una isla de patogenicidad (Schneditz et al., 2014). La proteína Lrp es un regulador global de la transcripción de islas de patogenicidad y factores de virulencia en diversas bacterias (Chen et al., 2002). Para investigar si la proteína Lrp está involucrada en la regulación de la expresión de los genes involucrados en la síntesis de la tilivalina, a partir de la cepa de K. oxytoca 09-7231 se generó la cepa mutante en el gen que codifica para la proteína reguladora Lrp (∆lrp). Se aisló RNA total y se evaluó la expresión de los genes aroX y npsA involucrados en la síntesis de la tilivalina en las cepas silvestre y ∆lrp mediante RT-PCR en tiempo real. El análisis estadístico de la expresión genética se realizó mediante la prueba t de Student no pareada de dos colas. La expresión de ambos genes (aroX y npsA) disminuyó significativamente en la cepa ∆lrp con respecto a la cepa silvestre. Los resultados indicaron que Lrp es un activador de la transcripción de los genes aroX y npsA. Además, mediante ensayos de movilidad electroforética se comprobó que la proteína Lrp regula de manera directa la expresión de dichos genes y se demostró por ensayos in silico que la leucina es indispensable para la actividad regulatoria de Lrp sobre ambos genes.

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